prosha Дата: 09.12.08 Время: 23:52
Ответ на сообщение: 42240564
— ФАКТЫ ОБ ЭМБРИОНАХ
https://www.miracleswaiting.org/factsembryos.html#q20
(если есть неточности и ошибки в переводе, просьба сообщить. prosha)
КАК ПОЛУЧАЮТСЯ ЭМБРИОНЫ В ПРОЦЕССЕ ЭКО? (пропустила – это везде есть)
НА КАКОЙ СТАДИИ ЗАМОРАЖИВАЮТ ЭМБРИОНЫ?
Эмбрионы могут быть заморожены на любой стадии в период с 1 по 6 день.
ЧТО ТАКОЕ ООЦИТ? ЭТО ТО ЖЕ САМОЕ ЧТО И ГАМЕТА?
Ооцит – это яйцеклетка. Гамета к полу не относится: так можно назвать и яйцеклетку и сперматозоид.
ЧТО ТАКОЕ 2PN ЭМБРИОН?
В каждой мужской и женской гамете (яйцеклетке и сперматозоиде) есть ядро с ДНК. В течение нескольких часов после проникновения сперматозоида, яйцеклетка отторгает половину своих хромосом в процессе, называемым мейозом.
(Процесс мейоза в сперматозоиде происходит значительно раньше, еще в яичках.) Оставшаяся группа ДНК в каждой гамете называется пронуклеусом. После того как сперматозоид проник в яйцеклетку, два пронуклеуса какое-то время существуют отдельно в цитоплазме яйцеклетки. Соответственно, эта самая ранняя стадия развития называется «стадией двух пронуклеусов» (или 2 PN). Когда эмбрионы развиваются в ЭКО лаборатории, эмбриолог будет искать доказательство первой стадии оплодотворения (2 пронуклеуса, близко расположенных друг к другу) спустя 16-18 часов после инсеминации.
ЧТО ТАКОЕ ЗИГОТА? ЧТО ТАКОЕ БЛАСТОМЕР?
Постепенно два пронуклеуса притягиваются друг к другу, их оболочки растворяются и процесс оплодотворения завершается формированием одного ядра. Теперь оплодотворенная яйцеклетка называется ЗИГОТОЙ. Ядро начинает дублировать себя, делясь на клетки, которые называются БЛАСТОМЕРАМИ. Этот процесс называется митоз. Сначала бластомеры достаточно большие, но с каждым делением, они получаются все меньше и меньше. В норме, эмбрионы достигают стадии 2-4 клеток через 24 часа после оплодотворения (два дня после пункции) и днем позже они поделятся до 8 клеток. Здесь, в США, 3-х дневные эмбрионы – самая ранняя стадия, на которой обычно происходит перенос в матку. Эмбрионы в период между оплодотворением и моментом, когда уже достаточно много клеток, называют эмбрионами на стадии деления. Также обычно это относится к 6-ти, 8-и клеточным и т.д. в соответствии со стадией развития.
ЧТО ТАКОЕ МОРУЛА?
Когда эмбрион достигает стадии 16-32 клеток, его называют морулой (форма тутовой ягоды, шелковицы).
ЧТО ТАКОЕ БЛАСТОЦИСТА?
В процессе деления, морула формирует внешнюю оболочку (трофобласт) вокруг наполненной жидкостью полости (бластоцели), внутри которой находится скопление клеток (эмбриобласт). На этот момент – это бластоциста. Обычно эмбрион достигает стадии бластоцисты к 5-му дню. В естественном цикле на этой стадии эмбрион достигает матки. Клетки трофобласта и эмбриобласта будут продолжать видоизменяться в процессе деления клеток бластоцисты, закладывая фундамент для плаценты, которая разовьется из трофобласта, и зародыша, который разовьется из внутреннего скопления клеток.
КАК ПРОИСХОДИТ ИМПЛАНТАЦИЯ?
Где-то к 6-му дню, бластоциста начнет выклевываться (хэтчинг) и прорываться через оболочку (zona pellucida), которая уже не может сдерживать делящиеся клетки.
Трофобласт (внешнее кольцо клеток) секретирует фермент, который готовит стенку матки к имплантации. Клетки трофобласта проникают в оболочку матки, разрушая ее клетки и образуют кровяной пул, который стимулирует рост капилляров. Часть трофобласта станет плацентой и в течение 13 дней после овуляции формируются ворсинки хориона, с помощью которых на место прикрепляется развивающаяся плацента.
ЧТО ТАКОЕ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЙ ХЭТЧИНГ?
Вспомогательный хэтчинг – это микроманипуляция, при которой небольшой прокол делается в мембране, окружающей эмбрион (zona pellucida). Эта мембрана удерживает бластомеры и во время естественного зачатия помогает предотвратить раннюю имплантацию в фаллопиевых трубах. Обычно она исчезает в момент, когда бластоциста готовится к имплантации в матку. Иногда, из-за возраста женщины, или заморозки, или других факторов, мембрана бывает утолщенной и растущая бластоциста не может освободиться. В таких ситуациях применяется вспомогательный хэтчинг. Вспомогательный хэтчинг выполняется либо лазером, либо слабым кислым раствором, который наносят в подходящее место, а потом отсасывают. После этого эмбрион отмывают, чтобы смыть все остатки этого раствора, и возвращают в пробирку с питательной средой дожидаться переноса. Существует риск идентичных близнецов когда применяется вспомогательный хэтчинг либо другие микроманипуляци.
КАКИЕ ЭМБРИОНЫ ЛУЧШЕ ПЕРЕНОСИТЬ 8-КЛЕТОЧНЫЕ ИЛИ БЛАСТОЦИСТЫ?
Существуют различные мнения насчет того, какие эмбрионы лучше переносить – на 3 день (на стадии деления) или на 5 день (бластоцисты). Можно ответить, что это зависит от ведения протокола в твоей клинике. Некоторые клиники не наблюдают существенной разницы в проценте наступления беременности при применении того или другого метода, либо предполагают, что эмбрионы, которые не доживают до стадии бластоцисты в лаборатории могли бы выжить внутри матки. Однако, аргумент в пользу культивирования эмбриона в лаборатории дольше – двоякий. Во-первых, эмбрион переносят в момент когда бы он в норме достиг матки, не подвергаясь потенциально вредному воздействию аминокислот и углеводов. Усовершенствованные культурные среды могут обеспечить более дружественную атмосферу в пробирке. Во-вторых, это позволяет выделить самые сильные и обнадеживающие эмбрионы из остальных и, тем самым, избежать возможности их потери в процессе заморозки/разморозки (крио), когда они могли бы быть выбраны для свежего переноса. Перенос меньшего количества крепких эмбрионов снижает риск часто имеющих место многоплодных беременностей ( тройняшек, четверняшек и т.д.). Во многих клиниках перенос бластоцист дает более высокий процент беременностей на каждый перенос, но в тот же момент и возрастает процент пар, у которых на 5-й день не остается жизнеспособных эмбрионов. В среднем около 30 % эмбрионов доживают до стадии бластоцисты, остальные 70 % перестают развиваться. Неизвестно, выжили ли бы эти эмбрионы, если бы их перенесли раньше: здесь и разворачиваются дебаты. (Фактические проценты варьируются от клиники к клинике, от пациента к пациенту.
В среднем, эмбрионы, полученные от доноров и более молодых пациентов, чаше доживают до стадии бластоцист, чем эмбрионы возрастных пациентов). Чаще всего, клиники выбирают доращивание в лаборатории, если имеется достаточное количество эмбрионов хорошего качества на 3 день (8-10 клеток или более) и вероятно, что к 5-му дню будет адекватное количество эмбрионов для переноса.
ФАКТЫ ОБ ЭМБРИОНАХ (КРИО)
https://www.miracleswaiting.org/factsembryos.html#q20
(если есть неточности и ошибки в переводе, просьба сообщить. prosha)
КАК ЗАМОРАЖИВАЮТСЯ И ХРАНЯТСЯ ЭБРИОНЫ ПОСЛЕ ЭКО?
Очень аккуратно! Во время процесса заморозки, даже при соблюдении строжайшего порядка в лабораториях ЭКО, эмбрионы должны преодолеть опасность формирования кристаллов льда, чрезмерного изменения температуры, PH и концентрации электролитов в среде, а так же изменения трансмембранного потенциала (? – transmembrane water movement).
Клетки эмбриона, как и другие живые ткани, содержат воду. Вода формирует острые кристаллы льда, которые разрастаются в процессе заморозки. Если их не убрать в самом начале, эмбрион может разорваться. При замораживании также образуются губительные для эмбриона соли в воде. Во избежание этой проблемы, из эмбрионов вода удаляется и заменяется криозащитным раствором, который не формирует льда. Эмбрионы помещаются в солевой раствор фосфатного буфера на некоторое время (5-10 минут). Затем помещаются в раствор высококонцентрированного проникающего криопротектора (highly osmotic cryoprotectant fluid). Эмбрион временно сжимается, т.к. быстро дегидрируется. Затем быстро расширяется обратно, когда криопротектор замещает воду. Эта процедура занимает всего несколько минут, после чего эмбрион готов к заморозке. В разных клиниках соответствующие протоколы варьируются, но проходят по одному сценарию.
Эмбрионы помещаются в стеклянные или пластиковые соломинки для дальнейшего хранения. Обычно в каждую соломинку на хранение помещаются 1-4 эмбриона из одного протокола с учетом того, сколько эмбрионов планируется в будущем разморозить и сразу подсадить. Соломинки предварительно охлаждаются, помещаются в канистры, которые опускаются в терморегулируемые изолированные хранилища-танки (сосуды Дьюара) с жидким азотом. Постепенный процесс заморозки занимает несколько часов.
СКОЛЬКО ВРЕМЕНИ НУЖНО НА РАЗМОРОЗКУ ЭМБРИОНА?
После того как эмбрионы достали из криобанка, они размораживаются до комнатной температуры меньше чем за минуту или две. Но полностью процесс разморозки занимает около 40 минут перед тем как эмбрионы готовы к переносу или дальнейшей заморозке.
КАК ПРОИСХОДИТ РАЗМОРАЖИВАНИЕ?
Эмбрионы достаются из канистр и они остывают до комнатной температуры. В отличие от подготовки эмбрионов к процессу заморозки, здесь криозащитный раствор постепенно удаляется и замещается водой при помещении эмбрионов в высокорастворимые среды, в которых содержится больше воды и меньше криопотекторов. И снова, эмбрион может разорваться при поступлении воды в клетки. Так что этот процесс аккуратно контролируется. Затем эмбрион доводят до температуры тела и подсаживают, либо помещаются в культурную среду в инкубатор в ожидании переноса. Обычно, перед подсадкой качество эмбрионов переоценивается.
ВСЕ ЛИ ЭМБРИОНЫ ПЕРЕЖИВУТ РАЗМОРОЗКУ?
Насколько хорошо эмбрионы переживут разморозку зависит от самого протокола заморозки/разморозки и качества эмбрионов перед заморозкой. Эмбрионы, которые были более высокого качества перед заморозкой, лучше переживают крио. Многие клиники не замораживают эмбрионы неудобоваримого качества. К 3 дню они должны быть минимум 6-ти клеточными и иметь не более 20-25% фрагментаций, иначе они не переживут процесс. Обычно процент разморозки варьируется от 50 до 80 %, достигая в большинстве лабораторий более 70%. Важно узнать процент удачной разморозки в клинике, в которой ты будешь делать протокол.
После разморозки эмбрионы оцениваются. В некоторых все клетки погибнут. Такие эмбрионы называются «атретичными» (atretic). Другие могут иметь часть поврежденных клеток (таких эмбрионов большинство). Повреждения могут быть незначительными или серьезными. Несмотря на то, что процент последующих беременностей несомненно обратно пропорционален степени повреждения эмбриона, такие эмбрионы часто восстанавливаются и все еще имеют возможность привести к рождению ребенка. Такой случай был ярко продемонстрирован самыми первыми родами после крио протокола в Австралии в 1984 году. Эмбрион был заморожен на стадии 8 клеток, но 2 клетки погибли в процессе заморозки/разморозки. Его перенесли 6-ти клеточным. Он выжил, имплантировался и, в конечном итоге, доказал миру, что криоконсервация человеческого эмбриона с успешным исходом возможна. С того времени, бесчисленное количество детей было рождено благодаря этой процедуре и часто после переноса эмбрионов, которые в какой-то степени пережили гибель части своих клеток.
Самое лучшее качество эмбрионов тех, в которых клетки остались на 100% неповрежденными. Было предположено, что большинство таких эмбрионов настолько же жизнеспособны, как если бы они не были заморожены. Но таких эмбрионов немного.
По наблюдениям, эмбрионы с четным количеством клеток имеют преимущества перед эмбрионами с нечетным количеством клеток; они переживают крио на 5-10% больше. Также, по наблюдениям, эмбрионы с донорскими яйцеклетками переносят крио лучше (примерно на 2-5%), чем эмбрионы того же качества с использованием яйцеклетки пары, лечащейся от бесплодия.
Процент выживания также может зависеть от того, на какой стадии был заморожен эмбрион. Есть свидетельство того, что эмбрионы, замороженные на более ранней стадии, лучше переносят крио. Возможно потому, что они более просты по структуре и еще не затронуты мембраны ядра. (По этой причине, если есть очень большое количество эмбрионов хорошего качества, одна порция может быть заморожена на стадии 2PN, другая – помещена в лабораторию для культивирования 8-клеточных эмбрионов и бластоцист для свежего переноса). Однако, также допускается, что балстоцисты могут лучше пережить крио, т.к. у них больше клеток и им проще компенсировать потерю некоторых из них. На практике, происходит по-разному и зависит от варианта крио протокола, используемого в каждой отдельной лаборатории. Что бы не применяла твоя клиника, самое главное, чтобы это приводило у них к результату.
ЧЕРЕЗ КАКОЕ ВРЕМЯ ПОСЛЕ РАЗМОРОЗКИ ПЕРЕНОСЯТСЯ ЭМБРИОНЫ?
Бластоцисты и эмбрионы на стадии деления могут быть перенесены сразу после разморозки (через 0-6 часов). А эмбрионы, замороженные на более ранней стадии часто культивируются еще один день и переносятся на стадии деления или бластоцисты.
СКОЛЬКО ЭМБРИОНЫ МОГУТ ОСТАВАТЬСЯ ЗАМОРОЖЕННЫМИ И БЫТЬ ЖИЗНЕСПОСОБНЫМИ?
Теоретически эмбрионы могут оставаться замороженными неограниченное количество времени, т.к. во время криоконсервации нет биоактивности. В практике, неизвестно, сколько по времени они остаются жизнеспособными. Первые крио переносы которые привели к рождению ребенка, проводились в середине восьмидесятых. С того момента, 12-летние крио эмбрионы дали беременность. Крио протоколы усовершенствуются и, возможно, недавно замороженные эмбрионы дадут лучший результат.
У КРИО ЭМБРИОНОВ ТАКИЕ ЖЕ ШАНСЫ НА БЕРЕМЕННОСТЬ КАК И У СВЕЖИХ?
Процент успеха при переносе крио эмбрионов обычно ниже, чем со свежими.
Это может происходить по причине повреждения эмбриона при заморозке/разморозке, но и также из-за того, что во взятом протоколе эмбрионы лучшего качества уже были перенесены свежими. К тому же, у пациентов в крио протоколе, уже была неудача, нежели у проходящих свежий протокол.
МОЖНО ЛИ ЗАМОРАЖИВАТЬ ЭМБРИОНЫ БОЛЬШЕ ОДНОГО РАЗА?
Да. Иногда, когда большое количество эмбрионов замораживаются на ранней стадии развития (2PN), все или большее число из них будет разморожено и культивировано. Как и в свежем протоколе, для подсадки будут выбраны эмбрионы лучшего качества, а остальные заморожены снова. Перенос дважды замороженных эмбрионов приводит к рождению ребенка, но некоторые из тех же факторов, которые влияют на эффективность процедуры после переноса крио эмбрионов (по сравнению со свежими), могут уменьшить процент успеха в протоколах с дважды замороженными эмбрионами.
(Продолжение следует)
Ответ на сообщение: 42240564
— ФАКТЫ ОБ ЭМБРИОНАХ
https://www.miracleswaiting.org/factsembryos.html#q20
(если есть неточности и ошибки в переводе, просьба сообщить. prosha)
КАК ПОЛУЧАЮТСЯ ЭМБРИОНЫ В ПРОЦЕССЕ ЭКО? (пропустила – это везде есть)
НА КАКОЙ СТАДИИ ЗАМОРАЖИВАЮТ ЭМБРИОНЫ?
Эмбрионы могут быть заморожены на любой стадии в период с 1 по 6 день.
ЧТО ТАКОЕ ООЦИТ? ЭТО ТО ЖЕ САМОЕ ЧТО И ГАМЕТА?
Ооцит – это яйцеклетка. Гамета к полу не относится: так можно назвать и яйцеклетку и сперматозоид.
ЧТО ТАКОЕ 2PN ЭМБРИОН?
В каждой мужской и женской гамете (яйцеклетке и сперматозоиде) есть ядро с ДНК. В течение нескольких часов после проникновения сперматозоида, яйцеклетка отторгает половину своих хромосом в процессе, называемым мейозом.
(Процесс мейоза в сперматозоиде происходит значительно раньше, еще в яичках.) Оставшаяся группа ДНК в каждой гамете называется пронуклеусом. После того как сперматозоид проник в яйцеклетку, два пронуклеуса какое-то время существуют отдельно в цитоплазме яйцеклетки. Соответственно, эта самая ранняя стадия развития называется «стадией двух пронуклеусов» (или 2 PN). Когда эмбрионы развиваются в ЭКО лаборатории, эмбриолог будет искать доказательство первой стадии оплодотворения (2 пронуклеуса, близко расположенных друг к другу) спустя 16-18 часов после инсеминации.
ЧТО ТАКОЕ ЗИГОТА? ЧТО ТАКОЕ БЛАСТОМЕР?
Постепенно два пронуклеуса притягиваются друг к другу, их оболочки растворяются и процесс оплодотворения завершается формированием одного ядра. Теперь оплодотворенная яйцеклетка называется ЗИГОТОЙ. Ядро начинает дублировать себя, делясь на клетки, которые называются БЛАСТОМЕРАМИ. Этот процесс называется митоз. Сначала бластомеры достаточно большие, но с каждым делением, они получаются все меньше и меньше. В норме, эмбрионы достигают стадии 2-4 клеток через 24 часа после оплодотворения (два дня после пункции) и днем позже они поделятся до 8 клеток. Здесь, в США, 3-х дневные эмбрионы – самая ранняя стадия, на которой обычно происходит перенос в матку. Эмбрионы в период между оплодотворением и моментом, когда уже достаточно много клеток, называют эмбрионами на стадии деления. Также обычно это относится к 6-ти, 8-и клеточным и т.д. в соответствии со стадией развития.
ЧТО ТАКОЕ МОРУЛА?
Когда эмбрион достигает стадии 16-32 клеток, его называют морулой (форма тутовой ягоды, шелковицы).
ЧТО ТАКОЕ БЛАСТОЦИСТА?
В процессе деления, морула формирует внешнюю оболочку (трофобласт) вокруг наполненной жидкостью полости (бластоцели), внутри которой находится скопление клеток (эмбриобласт). На этот момент – это бластоциста. Обычно эмбрион достигает стадии бластоцисты к 5-му дню. В естественном цикле на этой стадии эмбрион достигает матки. Клетки трофобласта и эмбриобласта будут продолжать видоизменяться в процессе деления клеток бластоцисты, закладывая фундамент для плаценты, которая разовьется из трофобласта, и зародыша, который разовьется из внутреннего скопления клеток.
КАК ПРОИСХОДИТ ИМПЛАНТАЦИЯ?
Где-то к 6-му дню, бластоциста начнет выклевываться (хэтчинг) и прорываться через оболочку (zona pellucida), которая уже не может сдерживать делящиеся клетки.
Трофобласт (внешнее кольцо клеток) секретирует фермент, который готовит стенку матки к имплантации. Клетки трофобласта проникают в оболочку матки, разрушая ее клетки и образуют кровяной пул, который стимулирует рост капилляров. Часть трофобласта станет плацентой и в течение 13 дней после овуляции формируются ворсинки хориона, с помощью которых на место прикрепляется развивающаяся плацента.
ЧТО ТАКОЕ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЙ ХЭТЧИНГ?
Вспомогательный хэтчинг – это микроманипуляция, при которой небольшой прокол делается в мембране, окружающей эмбрион (zona pellucida). Эта мембрана удерживает бластомеры и во время естественного зачатия помогает предотвратить раннюю имплантацию в фаллопиевых трубах. Обычно она исчезает в момент, когда бластоциста готовится к имплантации в матку. Иногда, из-за возраста женщины, или заморозки, или других факторов, мембрана бывает утолщенной и растущая бластоциста не может освободиться. В таких ситуациях применяется вспомогательный хэтчинг. Вспомогательный хэтчинг выполняется либо лазером, либо слабым кислым раствором, который наносят в подходящее место, а потом отсасывают. После этого эмбрион отмывают, чтобы смыть все остатки этого раствора, и возвращают в пробирку с питательной средой дожидаться переноса. Существует риск идентичных близнецов когда применяется вспомогательный хэтчинг либо другие микроманипуляци.
КАКИЕ ЭМБРИОНЫ ЛУЧШЕ ПЕРЕНОСИТЬ 8-КЛЕТОЧНЫЕ ИЛИ БЛАСТОЦИСТЫ?
Существуют различные мнения насчет того, какие эмбрионы лучше переносить – на 3 день (на стадии деления) или на 5 день (бластоцисты). Можно ответить, что это зависит от ведения протокола в твоей клинике. Некоторые клиники не наблюдают существенной разницы в проценте наступления беременности при применении того или другого метода, либо предполагают, что эмбрионы, которые не доживают до стадии бластоцисты в лаборатории могли бы выжить внутри матки. Однако, аргумент в пользу культивирования эмбриона в лаборатории дольше – двоякий. Во-первых, эмбрион переносят в момент когда бы он в норме достиг матки, не подвергаясь потенциально вредному воздействию аминокислот и углеводов. Усовершенствованные культурные среды могут обеспечить более дружественную атмосферу в пробирке. Во-вторых, это позволяет выделить самые сильные и обнадеживающие эмбрионы из остальных и, тем самым, избежать возможности их потери в процессе заморозки/разморозки (крио), когда они могли бы быть выбраны для свежего переноса. Перенос меньшего количества крепких эмбрионов снижает риск часто имеющих место многоплодных беременностей ( тройняшек, четверняшек и т.д.). Во многих клиниках перенос бластоцист дает более высокий процент беременностей на каждый перенос, но в тот же момент и возрастает процент пар, у которых на 5-й день не остается жизнеспособных эмбрионов. В среднем около 30 % эмбрионов доживают до стадии бластоцисты, остальные 70 % перестают развиваться. Неизвестно, выжили ли бы эти эмбрионы, если бы их перенесли раньше: здесь и разворачиваются дебаты. (Фактические проценты варьируются от клиники к клинике, от пациента к пациенту.
В среднем, эмбрионы, полученные от доноров и более молодых пациентов, чаше доживают до стадии бластоцист, чем эмбрионы возрастных пациентов). Чаще всего, клиники выбирают доращивание в лаборатории, если имеется достаточное количество эмбрионов хорошего качества на 3 день (8-10 клеток или более) и вероятно, что к 5-му дню будет адекватное количество эмбрионов для переноса.
ФАКТЫ ОБ ЭМБРИОНАХ (КРИО)
https://www.miracleswaiting.org/factsembryos.html#q20
(если есть неточности и ошибки в переводе, просьба сообщить. prosha)
КАК ЗАМОРАЖИВАЮТСЯ И ХРАНЯТСЯ ЭБРИОНЫ ПОСЛЕ ЭКО?
Очень аккуратно! Во время процесса заморозки, даже при соблюдении строжайшего порядка в лабораториях ЭКО, эмбрионы должны преодолеть опасность формирования кристаллов льда, чрезмерного изменения температуры, PH и концентрации электролитов в среде, а так же изменения трансмембранного потенциала (? – transmembrane water movement).
Клетки эмбриона, как и другие живые ткани, содержат воду. Вода формирует острые кристаллы льда, которые разрастаются в процессе заморозки. Если их не убрать в самом начале, эмбрион может разорваться. При замораживании также образуются губительные для эмбриона соли в воде. Во избежание этой проблемы, из эмбрионов вода удаляется и заменяется криозащитным раствором, который не формирует льда. Эмбрионы помещаются в солевой раствор фосфатного буфера на некоторое время (5-10 минут). Затем помещаются в раствор высококонцентрированного проникающего криопротектора (highly osmotic cryoprotectant fluid). Эмбрион временно сжимается, т.к. быстро дегидрируется. Затем быстро расширяется обратно, когда криопротектор замещает воду. Эта процедура занимает всего несколько минут, после чего эмбрион готов к заморозке. В разных клиниках соответствующие протоколы варьируются, но проходят по одному сценарию.
Эмбрионы помещаются в стеклянные или пластиковые соломинки для дальнейшего хранения. Обычно в каждую соломинку на хранение помещаются 1-4 эмбриона из одного протокола с учетом того, сколько эмбрионов планируется в будущем разморозить и сразу подсадить. Соломинки предварительно охлаждаются, помещаются в канистры, которые опускаются в терморегулируемые изолированные хранилища-танки (сосуды Дьюара) с жидким азотом. Постепенный процесс заморозки занимает несколько часов.
СКОЛЬКО ВРЕМЕНИ НУЖНО НА РАЗМОРОЗКУ ЭМБРИОНА?
После того как эмбрионы достали из криобанка, они размораживаются до комнатной температуры меньше чем за минуту или две. Но полностью процесс разморозки занимает около 40 минут перед тем как эмбрионы готовы к переносу или дальнейшей заморозке.
КАК ПРОИСХОДИТ РАЗМОРАЖИВАНИЕ?
Эмбрионы достаются из канистр и они остывают до комнатной температуры. В отличие от подготовки эмбрионов к процессу заморозки, здесь криозащитный раствор постепенно удаляется и замещается водой при помещении эмбрионов в высокорастворимые среды, в которых содержится больше воды и меньше криопотекторов. И снова, эмбрион может разорваться при поступлении воды в клетки. Так что этот процесс аккуратно контролируется. Затем эмбрион доводят до температуры тела и подсаживают, либо помещаются в культурную среду в инкубатор в ожидании переноса. Обычно, перед подсадкой качество эмбрионов переоценивается.
ВСЕ ЛИ ЭМБРИОНЫ ПЕРЕЖИВУТ РАЗМОРОЗКУ?
Насколько хорошо эмбрионы переживут разморозку зависит от самого протокола заморозки/разморозки и качества эмбрионов перед заморозкой. Эмбрионы, которые были более высокого качества перед заморозкой, лучше переживают крио. Многие клиники не замораживают эмбрионы неудобоваримого качества. К 3 дню они должны быть минимум 6-ти клеточными и иметь не более 20-25% фрагментаций, иначе они не переживут процесс. Обычно процент разморозки варьируется от 50 до 80 %, достигая в большинстве лабораторий более 70%. Важно узнать процент удачной разморозки в клинике, в которой ты будешь делать протокол.
После разморозки эмбрионы оцениваются. В некоторых все клетки погибнут. Такие эмбрионы называются «атретичными» (atretic). Другие могут иметь часть поврежденных клеток (таких эмбрионов большинство). Повреждения могут быть незначительными или серьезными. Несмотря на то, что процент последующих беременностей несомненно обратно пропорционален степени повреждения эмбриона, такие эмбрионы часто восстанавливаются и все еще имеют возможность привести к рождению ребенка. Такой случай был ярко продемонстрирован самыми первыми родами после крио протокола в Австралии в 1984 году. Эмбрион был заморожен на стадии 8 клеток, но 2 клетки погибли в процессе заморозки/разморозки. Его перенесли 6-ти клеточным. Он выжил, имплантировался и, в конечном итоге, доказал миру, что криоконсервация человеческого эмбриона с успешным исходом возможна. С того времени, бесчисленное количество детей было рождено благодаря этой процедуре и часто после переноса эмбрионов, которые в какой-то степени пережили гибель части своих клеток.
Самое лучшее качество эмбрионов тех, в которых клетки остались на 100% неповрежденными. Было предположено, что большинство таких эмбрионов настолько же жизнеспособны, как если бы они не были заморожены. Но таких эмбрионов немного.
По наблюдениям, эмбрионы с четным количеством клеток имеют преимущества перед эмбрионами с нечетным количеством клеток; они переживают крио на 5-10% больше. Также, по наблюдениям, эмбрионы с донорскими яйцеклетками переносят крио лучше (примерно на 2-5%), чем эмбрионы того же качества с использованием яйцеклетки пары, лечащейся от бесплодия.
Процент выживания также может зависеть от того, на какой стадии был заморожен эмбрион. Есть свидетельство того, что эмбрионы, замороженные на более ранней стадии, лучше переносят крио. Возможно потому, что они более просты по структуре и еще не затронуты мембраны ядра. (По этой причине, если есть очень большое количество эмбрионов хорошего качества, одна порция может быть заморожена на стадии 2PN, другая – помещена в лабораторию для культивирования 8-клеточных эмбрионов и бластоцист для свежего переноса). Однако, также допускается, что балстоцисты могут лучше пережить крио, т.к. у них больше клеток и им проще компенсировать потерю некоторых из них. На практике, происходит по-разному и зависит от варианта крио протокола, используемого в каждой отдельной лаборатории. Что бы не применяла твоя клиника, самое главное, чтобы это приводило у них к результату.
ЧЕРЕЗ КАКОЕ ВРЕМЯ ПОСЛЕ РАЗМОРОЗКИ ПЕРЕНОСЯТСЯ ЭМБРИОНЫ?
Бластоцисты и эмбрионы на стадии деления могут быть перенесены сразу после разморозки (через 0-6 часов). А эмбрионы, замороженные на более ранней стадии часто культивируются еще один день и переносятся на стадии деления или бластоцисты.
СКОЛЬКО ЭМБРИОНЫ МОГУТ ОСТАВАТЬСЯ ЗАМОРОЖЕННЫМИ И БЫТЬ ЖИЗНЕСПОСОБНЫМИ?
Теоретически эмбрионы могут оставаться замороженными неограниченное количество времени, т.к. во время криоконсервации нет биоактивности. В практике, неизвестно, сколько по времени они остаются жизнеспособными. Первые крио переносы которые привели к рождению ребенка, проводились в середине восьмидесятых. С того момента, 12-летние крио эмбрионы дали беременность. Крио протоколы усовершенствуются и, возможно, недавно замороженные эмбрионы дадут лучший результат.
У КРИО ЭМБРИОНОВ ТАКИЕ ЖЕ ШАНСЫ НА БЕРЕМЕННОСТЬ КАК И У СВЕЖИХ?
Процент успеха при переносе крио эмбрионов обычно ниже, чем со свежими.
Это может происходить по причине повреждения эмбриона при заморозке/разморозке, но и также из-за того, что во взятом протоколе эмбрионы лучшего качества уже были перенесены свежими. К тому же, у пациентов в крио протоколе, уже была неудача, нежели у проходящих свежий протокол.
МОЖНО ЛИ ЗАМОРАЖИВАТЬ ЭМБРИОНЫ БОЛЬШЕ ОДНОГО РАЗА?
Да. Иногда, когда большое количество эмбрионов замораживаются на ранней стадии развития (2PN), все или большее число из них будет разморожено и культивировано. Как и в свежем протоколе, для подсадки будут выбраны эмбрионы лучшего качества, а остальные заморожены снова. Перенос дважды замороженных эмбрионов приводит к рождению ребенка, но некоторые из тех же факторов, которые влияют на эффективность процедуры после переноса крио эмбрионов (по сравнению со свежими), могут уменьшить процент успеха в протоколах с дважды замороженными эмбрионами.
(Продолжение следует)
Сама прошла эко. Первое, естественно. со свежими, а второе чуть больше года откладывали. Эмбрионы хранились в Криотоп все это время и криоконсервировались там же. Криопротокол прошел успешно. Вот и верь после этого статистике. Вообще у нас на этаже было много девочек после криопротокола и когда я уже наблюдалась в консультации, то и там нас было немало. Хотя 100 раз пожалела, что сказала врачу про эко. Начались перестраховки. Была бы ее воля, то она бы меня до родов в больнице привязанной к кушетке продержала «на всякий случай». Так что, девочки, кто идет на криопротокол. не переживайте, шансов у вас не меньше! Все получится. Главное, что бы врач был первоклассый, криоконсервировали и хранили без соприкосновения с жидкой фазой
В нексте так и делают.
Никто часом не задумывается какого это, быть сотворённым, любящим по природе своей, стремящимся к маме, а вместо жизни быть замороженными (телом, не душой, до неё то медицине там не добрать) лет на 8, а потом слитыми в унитаз, так как вы оказались «не очень», не имея никакого ресурса осознать, что происходит? И пережить весь этот кошмар, лишь по бестолковой прихоти самого родного существа. Становитесь же осознаннее, дамы
Че за бред
В моей клинике говорят, что % крио выше чем у естественное… В общем у меня было сразу крио, 1 раз
Очень полезный пост спасибо
Интересная статья! очень нужная и полезная информация..
Про крио статистика старая, когда еще не было нового способа заморозки методом витрификации, при новом методом 99% эмбрионов размораживается без повреждений.
Витрификация (стеклование, от лат.vitrum – стеклои лат.facio – делаю, превращаю), переход жидкости при понижении температуры в стеклообразное состояние.
В криобиологии самое критичное это образование кристаллов льда, которые образуются при заморозке и разморозке, повреждая биологическую клетку.
При использовании метода сверхбыстрого замораживания криопротекторный раствор, в котором находятся живые объекты, не кристаллизуется при охлаждении, а переходит в стекловидное состояние.
Выживаемость достигает 99% и зависит от криотолерантности (способности биологического объекта выжить после заморозки-разморозки) эмбрионов.
В закладки )
???
Неплохая статья, думаю женщины должны знать хотя бы такие основы что и как прежде чем идти в протокол ЭКО… а то некоторые идут, и даже не знают банальных вещей..
Сохранила в закладки. Супеи
Интересная информация ????
Очень интересная?
Я уже это все знала(
Я допустим не знала, оказываетмя качество эмбрионов портится после разморозки, я не знала
Не совсем согласна что портится. Если он выжил после заморозки то скорее приживется
Скорее это старая информация. На самом деле клиники хорошие эко Москвы давно уже хорошо делают крио программы. Раньше да были потери. Но все врачи давно перешли на крио программы. Изза меньшей нагрузки на организм.
Мне заморозили получается эмбрионы с 25% и больше фрегментацией((( и с момента разморозки и переноса прошло максимум 10 минут
Это очень быстро с момента разморозки и до оценки и всей бадьи 40 мин
Спасибо, очень интересно было все это узнать!:)